最新透析应用集锦（十六）
承接前几期内容，本期继续介绍几篇典型透析应用文章。
1
来自美国FDA药物评估和研究中心等的科学家们在2018年的《Journal of Controlled Release》杂志上发表了题为“Probing the mechanism of bupivacaine drug release from multivesicular liposomes”的文章。文中，在进行药物体外溶出的反向透析研究中，测试并使用了多种不同MWCO规格的Spectra/Por Float-A-Lyzer G2再生纤维素即用型透析装置。
摘要：药物从复杂的剂型，如多囊脂质体（MVL），中溶出的机制非常复杂，其通常对溶出环境较为敏感。这对合适的体外溶出检测（IVRT）方法的设计和开发造成了不小的挑战。在本研究中，选择一种商业化的布比卡因MVL产品作为模型，使用经改良的USP2设备，结合反向透析膜，开发了一种IVRT方法。该装置允许使用原位UV-Vis探针，以连续监测溶出过程中的药物浓度。与传统的采样并分离方法相比，新方法可更好地控制溶出条件，适于研究药物溶出机制。布比卡因（BPV）MVL呈现出明显的三相溶出特征，包括初始的爆发性溶出、滞后阶段以及二级溶出。研究观察了温度、pH、搅拌速度和溶出介质对BPV从MVL溶出的机制和速率。同时使用冷冻扫描电镜（Cyro-SEM）、共聚焦激光扫描显微镜和激光衍射分析了MVL粒径和形态及其内部囊泡腔室，结果显示MVL平均直径及其内“多面体”囊泡的平均直径分别为23.6±11.5μm和1.52±0.44μm。Cryo-SEM结果进一步显示，随着溶出的进行，颗粒粒径降低，且MVL的内部“多面体”结构弱化，这证实了脂质层的侵蚀和重排过程。基于这些结果，可得出一个可能的MVL药物溶出机制，其有利于用于相似制剂的、更加生物相关的IVRT方法的未来开发工作。
体外溶出设置中的透析（A）和反向透析（B）配置（S.Manna, et al., 2018）。
原文：S.Manna, Y.Wu, Y.Wang, et al., Probing the mechanism of bupivacaine drug release from multivesicular liposomes. Journal of Controlled Release, 2018, https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2018.12.029
2
来自爱尔兰利默里克大学的科学家们2019年第147期的《Postharvest Biology and Technology》杂志上发表了题为“Nisin application delays growth of Listeria monocytogenes on fresh-cut iceberg lettuce in modified atmosphere packaging, while the bacterial community structure changes within one week of storage”的文章。文中，使用MWCO 1-5kD 的Spectra/Por Float-A-Lyzer G2即用型透析装置对采购的商品化Nisin A（乳链菌肽A）进行透析纯化处理，以进行后续的实验。
摘要：单核增生李斯特菌能够在冷藏条件下生长，对生菜等加工程度较低的即食食品构成了一定的风险。由于许多抗李斯特菌的产品会使冰冻的生菜在2天的贮藏期不宜使用，所以本实验研究了Nisin A（乳链菌肽 A）作为抗李斯特菌剂的效力及其对生菜的感官影响。此外，还监测了贮藏期内，鲜切生菜上细菌群落的演化。体外分析确认了在模式环境和空气中，Nisin.A抑制李斯特菌三种混合菌株生长的效力。之后将李斯特菌混合菌株加入到生菜中，分别用Nisin、L.lactis DSM20729（一种Nisin.A生产菌）或不接种处理。在4℃和8℃的不同环境条件下进行孵育。在第0、2、5、7天，在选择性琼脂上对单核增生李斯特菌进行计数，并通过肉眼观察，对生菜进行感官评级。在4和8℃条件下，使用5mg/kg的Nisin，可在7天内，使单核增生李斯特菌的生长降低10至100倍，而在起始的5天内，生菜维持可接受的感官外观。直接应用L.lactis，对单核增生李斯特菌的原位生长无可检测的影响。在7天的孵育期内，细菌群落结构在每个采样日之间都呈现持续性的变化。但在所有的时间内，以假单胞菌属的假单胞菌科为最多，到第7天，相对丰度增加超过90%。总结来说，对加工程度较低的蔬菜，如生菜，使用Nisin A是降低和延迟感染性单核增生李斯特菌生长的一种可行方法，且在2-5天内不会影响其感官外观。
原文：O.McManamon, T.Kaupper, J.Scollard, et al., Nisin application delays growth of Listeria monocytogenes on fresh-cut iceberg lettuce in modified atmosphere packaging, while the bacterial community structure changes within one week of storage. Postharvest Biology andTechnology, 2019, 147:185-195.
3
来自日本北九州大学的科学家们在2018年的《Journal of Colloid and Interface Science》杂志上发表了题为“Dual and Multiple Stimuli-Responsive Platonic Micelles Bearing Disaccharides”的文章。文中，在合成载纤维双糖的杯[4]芳烃时，使用MWCO 0.1-0.5kD的Spectra/Por Float-A-Lyzer G2即用型透析装置对合成的产物进行透析纯化。
摘要：我们最近发现完全单分散的胶束，其聚集数（Nagg）与正多面体的顶点数重合，称为柏拉图胶束。将胶束特性与控制胶束结构的外部刺激相结合可能可用于生产精确控制的自组装结构。以此期望为基础，我们新合成了一种基于杯[4]-芳烃的含双糖-纤维二糖的两亲体。亲水基团中拥挤且庞大的结构为双亲体中的双糖提供了一种新的刺激反应性。使用小角度散射技术和分析性超速离心检测方法鉴定了基于杯[4]-芳烃的胶束诸如形态和聚集数的聚集行为。由于双糖之间的氢键作用，头部体积小于预期，从而形成了圆柱形结构。但是，通过控制温度或pH而切开氢键，可使胶束结构发生从圆柱形到球形的形态转变。双刺激（温度和pH）生成的更小胶束的Nagg为12。有趣的是，在不同条件下，当两亲体形成球状胶束时，Nagg与柏拉图数相匹配，外部刺激导致的Nagg的变化是不连续的，这与柏拉图胶束的概念一致。
原文：R.Miyake, S.Fujii, J.H.Lee, et al., Dual and Multiple Stimuli-Responsive Platonic Micelles Bearing Disaccharides. Journal of Colloid and Interface Science, 2018, doi: https://doi.org/10.1016/j.jcis.2018.09.044.
4
来自美国特拉华大学等的科学家们在2019年第24期的《Molecules》杂志上发表了题为“Small Polar Molecules A Challenge in Marine Chemical Ecology”的文章。文中，使用MWCO 0.1-0.5kD的Spectra/Por Float-A-Lyzer G2即用型透析装置，通过透析方法对灭藻剂的大小进行评估。
摘要：鉴于越来越多证据表明海洋生态系统中存在关键化学介导的相互作用，近年来对参与此类物种内和物种间相互作用的代谢物进行鉴定的兴趣不断增加。然而，仅有少数研究成功鉴定了目的化合物的化学结构。这种低成功率的一个原因是大部分此类化合物较小的分子量和极度的极性特性。事实上，寻找活性代谢物的一个主要挑战是从海水中提取小极性的化合物。然而，对此类代谢物的全面鉴定对于了解其所介导的相互作用是必需的。在此背景下，本研究旨在为海水基质中高极性、低分子量化合物的鉴定提供一种方法，以作为海洋生态学家鉴定活性代谢物工作的指南。使用该方法研究了细菌Shewanella sp. IRI-160分泌的一种灭藻化合物的化学结构，其之前被证实可诱导甲藻细胞的程序性死亡。结果表明，灭藻效果可能是由于Shewanella sp. IRI-160大量（0.05-6.5fmol/cell）生产的腐胺的异化而产生的小胺（铵，4-氨基丁醛）的协同作用所致。
原文：E.Ternon, Y.Wang, K.J.Coyne, Small Polar Molecules A Challenge in Marine Chemical Ecology. Molecules, 2019, 24:135.
5
来自美国西北大学的科学家们在2019年的《Environmental Science Nano》杂志上发表了题为“Photochemical interactions between n-Ag2S and n-TiO2 amplify their bacterial stress response”的文章。文中，在制备纳米材料时，使用MWCO 0.5-1kD的Spectra/Por Float-A-Lyzer G2即用型透析装置，通过透析处理，从纳米材料溶液中，去除过量的试剂。
摘要：在湿地的还原条件和厌氧废水处理工艺下，从消费品中释放的纳米银（n-Ag）可与硫化物反应形成Ag2S，其被认为较为稳定且实际上是良性的。但是，在自然环境中，这些纳米粒径的硫化银颗粒（n-Ag2S）可与光和其它纳米材料相互作用，形成氧化条件，破坏n-Ag2S的稳定性，释放Ag+，并导致微生物的应激。通过监测暴露于n-Ag2S和n-TiO2混合物的E.Coli的ATP水平，我们研究了这种情况，n-TiO2是另一种极有可能经环境释放的纳米材料。在黑暗条件下，我们发现硫化作用提高了与n-Ag相关的微生物应激的阈值浓度。在模拟的阳光辐照（SSI）下及检测的浓度范围内，单独暴露于n-Ag2S不会降低细菌ATP水平。但是，在存在1mg/L n-TiO2的SSI条件下，n-Ag2S可引起协同毒性应激，提高活性氧（ROS）的生产。基于此类纳米材料的光化学特性以及我们对溶解的Ag的检测，我们认为在环境条件下，n-TiO2生产的ROS可溶解n-Ag2S，释放Ag+，其可在n-TiO2表面经光还原形成高度光活性和光毒性的纳米复合材料。本项工作显示，在氧化条件下，n-Ag2S容易发生转化，而引起微生物应激。总结来说，我们进一步证实，在辐照条件下，多种纳米材料之间的化学相互作用可显著改变其毒性效力。
原文：C.M.Wilke, C.Petersen, M.A.Alsina, et al., Photochemical interactions between n-Ag2S and n-TiO2 amplify their bacterial stress response. Environmental Science Nano, 2019, 6: 115.
文章摘要为编者翻译，由于水平有限，如有不当之处，敬请谅解，详细内容，请参考原文。
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为了使用方便，透析膜也可以预先组装成不同类型的即用透析装置（RDD）：Float-A-Lyzer G2及micro Float-A-Lyzer、Tube-A-Lyzer和透析袋。